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色譜柱反沖真的有用嗎?

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時間:2024-06-24
那么,今天我們就來分析討論一下!色譜柱到底能不能反沖,以及背后的原因是什么?

液相色譜柱能夠反沖?

這是很多用液相色譜技術人員的一個疑問。


看到有小伙伴說,如果色譜柱柱頭堵了,壓力升高了,反沖完的效果也不錯。


也有小伙伴說,廠家說不建議反沖,沖了會影響柱效?。。?/span>


那么,今天我們就來分析討論一下!色譜柱到底能不能反沖,以及背后的原因是什么?



Q

當色譜圖峰型變差或儀器壓力過高時,我們會使用不同溶劑對色譜柱進行反向沖洗,雖然看到了一些改進,但效果并不穩(wěn)定。我們該如何改進呢?

答:作為色譜柱生產廠家,小研并不提倡反向沖柱。大多數(shù)情況下,反向沖柱并不起作用,而當我們認為它起作用時,也可以通過更合理的方式來改善。

什么情況下我們需要嘗試對色譜柱反向沖洗?原因可能有:由于流動相或 HPLC 儀器中的樣品成分或碎屑堆積在柱頭導致的壓力升高、色譜柱性能顯著下降

如果碎屑足夠多,就會聚集在色譜柱過濾片的外表面,導致過濾片損壞,這種情況下,更換過濾片與反向沖洗的效果是一樣的。

色譜柱構造示意圖

不過,根據(jù)小研的經驗,過濾片損壞的問題是比較少發(fā)生的,一般是色譜柱柱頭被污染物污染并吸附堵塞,導致色譜柱壓力升高。當污染物分子量較大或溶解度較低時,會堵塞色譜柱內填料之間的通道,而第一層填料受到污染物的作用力最大,填料層被擠壓重新排列、變形,甚至塌陷,最終導致峰形惡化。要修復這種填料結構內部的損壞是非常困難的,甚至是不可能的,反向沖洗色譜柱充其量只是一場賭博。

Q

反向沖洗可能不是一個很好的解決方案,但確實有幫助,至少可以讓色譜柱的壽命更長一些?


答:反沖色譜柱有一點幫助但不多,小研喜歡更可靠、更持久的解決方案——保護柱。

保護柱通常是指安裝在進樣器和分析柱之間的小短柱,通過預先捕集能被分析柱牢固吸附,不能被流動相所洗脫的物質,保護并延長分析柱使用壽命。

保護柱就像是疫情期間必備的口罩,把病毒阻擋在人體外面,流動相和樣品里如有什么損害柱子的污染物,保護柱就自己承受,不會讓其進入分析柱。



Q

市場上有許多不同的保護柱。我應該使用哪一種?


答:保護柱很重要,但選擇合適的保護柱更重要,選擇或使用不當也可能帶來截然相反的效果。保護柱的填料,要與分析柱保持一致!填料品牌一致,才能100%確保選擇性一致。


此外,保護柱的規(guī)格,要與分析柱匹配!填料粒徑一致,保護柱的內徑與分析柱的內徑相近。對于精細分離,保護柱本身的裝填柱效要足夠好!

保護柱建議專柱專用,避免保護柱成為不同項目的交叉污染源。當峰的理論塔板數(shù)下降15%,或是柱壓上升15%,或是關鍵分離度下降15%時,都應該及時更換保護柱。
好消息!

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總結
手性色譜柱嬌貴,需要嚴格按照說明書使用反沖是不建議的!
知其然、知其所以然、知其所以必然。今日小研分享的知識就先到這啦,希望能對你們有所幫助!


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