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影響色譜柱性能的物理參數(shù)有哪些?

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時(shí)間:2021-05-25
隨著HPLC的普及,分析方法學(xué)的開(kāi)發(fā)成為一個(gè)合格的分析研究員的標(biāo)配,而色譜柱的篩選是分析方法開(kāi)發(fā)的第一步,也是最重要的一步,優(yōu)秀的分析研究員可以根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)特征很快確立所需的色譜柱

  隨著HPLC的普及,分析方法學(xué)的開(kāi)發(fā)成為一個(gè)合格的分析研究員的標(biāo)配,而色譜柱的篩選是分析方法開(kāi)發(fā)的第一步,也是最重要的一步,優(yōu)秀的分析研究員可以根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)特征很快確立所需的色譜柱,然后根據(jù)化合物的Pka,logP確立流動(dòng)相。那影響色譜柱性能的物理參數(shù)有哪些?

色譜柱

  (1)硅膠純度

  硅膠純度和殘留金屬離子濃度,硅膠的雜質(zhì)會(huì)影響化合物的峰形,硅膠表面的金屬含量高會(huì)影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾。

  (2)色譜柱尺寸

  填料床的長(zhǎng)度和內(nèi)徑,增加色譜柱長(zhǎng)度,可以在一定程度上提高柱效,但也會(huì)升高壓力和導(dǎo)致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會(huì)增加橫向擴(kuò)散,同樣會(huì)導(dǎo)致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑,可減少橫向擴(kuò)散,但壓力較大,對(duì)系統(tǒng)要求較高。

  (3)顆粒形狀及粒徑

  球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻,不規(guī)則形柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動(dòng)相線(xiàn)速度不均勻,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。

  (4)顆粒表面積

  顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,以m2/g表示,相對(duì)而言高表面積對(duì)樣品具有較強(qiáng)的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達(dá)到平衡狀態(tài),更適合梯度洗脫程序。

  (5)孔徑

  顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍是80~300?,大孔徑的填料顆??梢匝娱L(zhǎng)大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時(shí)間,改善分離,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動(dòng)力體積較大的分子。

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