正確使用和維護(hù)Inertsil色譜柱至關(guān)重要，稍有疏忽就可能導(dǎo)致柱效降低、壽命縮短甚至損壞。在色譜操作中，需留意以下事項(xiàng)，以確保色譜柱的維護(hù)工作。

1、要避免急劇的壓力和溫度變化，以及任何機(jī)械振動(dòng)。溫度忽然變化或色譜柱從高處掉落都可能影響柱內(nèi)填料的狀況；而壓力忽然增高或減低也會(huì)影響柱內(nèi)填充物。因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)需緩慢進(jìn)行，在閥門進(jìn)樣時(shí)也不能轉(zhuǎn)動(dòng)得太快。

2、需要逐步調(diào)整溶劑的成分，特別是在反相色譜中，并不宜直接從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)變?yōu)槿軇?，反之亦然?/p>

3、一般情況下，色譜柱不宜進(jìn)行反向洗脫。只有在生產(chǎn)商明確指示柱子可以進(jìn)行反向洗脫才可這樣做，以去除殘留在柱頭的雜質(zhì)。若沒(méi)有明確說(shuō)明，反向洗脫可能會(huì)迅速降低柱效。

4、選擇合適的流動(dòng)相至關(guān)重要，尤其是要考慮pH值，以確保固定相不會(huì)受到破壞。有時(shí)在進(jìn)樣器之前連接一個(gè)預(yù)柱可以幫助保護(hù)分析柱，特別是當(dāng)分析柱是鍵合硅膠時(shí)。預(yù)柱使用硅膠，這樣流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前就會(huì)被硅膠“飽和”，有效地防止分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

5、避免直接將復(fù)雜基質(zhì)的樣品，尤其是生物樣品注入柱內(nèi)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或在進(jìn)樣器和色譜柱之間加裝一根保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填充有相同固定相的短柱，需要定期更換。

6、經(jīng)常使用強(qiáng)溶劑清洗色譜柱，以去除柱內(nèi)保留的雜質(zhì)。在清洗過(guò)程中，替換流動(dòng)相應(yīng)當(dāng)逐漸過(guò)渡到與原流動(dòng)相混溶的溶劑，每種流動(dòng)相的量應(yīng)約為柱體積的20倍，即一般情況下需50~75毫升。

7、在儲(chǔ)存色譜柱時(shí)，應(yīng)該確保柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，同時(shí)緊固柱接頭，以防止溶劑揮發(fā)導(dǎo)致干燥。嚴(yán)禁讓緩沖溶液在柱內(nèi)靜置過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。

8、在使用色譜柱時(shí)，若遇到壓力升高的情況，一種可能是濾芯被堵塞，可考慮更換或清洗濾芯；另一種可能是大分子物質(zhì)進(jìn)入柱內(nèi)，導(dǎo)致柱頭受污染；若柱效降低或色譜峰形狀失真，可能是柱頭發(fā)生塌陷，引起死體積增加。