液相色譜保留時(shí)間總是飄忽不定，令人難以琢磨。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，色譜保留時(shí)間不重現(xiàn)分為兩種情況：一是保留時(shí)間單方向的漂移，即保留時(shí)間提前或延后；二是保留時(shí)間無規(guī)律的波動(dòng)，即保留時(shí)間忽前忽后。

介紹色譜保留時(shí)間漂移前，我們先來了解與區(qū)分保留時(shí)間、死時(shí)間、調(diào)整保留時(shí)間的概念：

調(diào)整保留時(shí)間=保留時(shí)間-死時(shí)間

※在實(shí)驗(yàn)室條件下（溫度、固定相等）一定時(shí)，調(diào)整保留時(shí)間僅決定于組分的性質(zhì)，因此調(diào)整保留時(shí)間是定性的基本參數(shù)。

那液相色譜中保留時(shí)間為何忽前忽后呢？下面我們來說說主要的影響因素及“破案”方法。

若發(fā)生保留時(shí)間漂移，需要考慮流動(dòng)相是否已使色譜柱達(dá)到充分的平衡。一般情況下，流動(dòng)相平衡色譜柱需要10-20個(gè)柱體積；但如果流動(dòng)相中有使用弱酸、弱堿、緩沖鹽和離子對(duì)試劑，或者固定相為正相硅膠等，則需要更長(zhǎng)的時(shí)間來平衡色譜柱。

這時(shí)也可能會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間的漂移，需要同時(shí)觀察色譜峰型、柱效、壓力的變化情況，推測(cè)色譜柱是否被污染。可以根據(jù)具體的測(cè)試條件來選擇適當(dāng)?shù)娜軇┻M(jìn)行色譜柱的沖洗，或更換新的色譜柱。為了延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，增加保護(hù)柱是非常有效的方法。

確認(rèn)柱溫的準(zhǔn)確性，柱溫的變化也會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間的變化。

流動(dòng)相中某種試劑的揮發(fā)，流動(dòng)相中不同試劑的比例配制有誤，也會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間的變化，需要確認(rèn)流動(dòng)相是否新鮮與正確。

觀察柱前壓力，如果壓力不穩(wěn)定或者偏離正常值，可能是泵流速不準(zhǔn)確或者有氣泡產(chǎn)生，出現(xiàn)保留時(shí)間的不穩(wěn)定，需要保證儀器流速的準(zhǔn)確性與穩(wěn)定性。

觀察系統(tǒng)壓力，如果幾次進(jìn)樣的壓力曲線不能重合或差別比較大，可能是系統(tǒng)存在泄露或堵塞，出現(xiàn)保留時(shí)間的不穩(wěn)定，需要依次排查系統(tǒng)中有無漏液或堵塞異常。

保持保留時(shí)間的重復(fù)性是重中之重！同時(shí)，也要盡可能避免保留時(shí)間的漂移！關(guān)注保留時(shí)間的穩(wěn)定性也能反映流動(dòng)相、檢測(cè)器等的正常情況！